Begegnungen mit der Natur 8, Arbeitsheft

39 Biotechnologie und Gentechnik Polymerase-Kettenreaktion (PCR-Methode) Um für eine DNA-Analyse ausreichend Material zu haben, wird die DNA-Probe zunächst vervielfältigt. Dies geschieht mit der PCR-Methode. Schulbuch Seite 140 O 1. Für eine PCR werden folgende Materialien benötigt, beschrifte mit den Begriffen die nebenstehende Abbildung: Thermocycler PCR-Tube DNA-Polymerase DNA-Nukleotide DNA-Probe Primer 2. Die Abbildung unten zeigt den Ablauf eines PCR-Zyklus. Ordne die Textpassagen den dargestellten Teilschritten rich- tig zu. Mit dem Erhitzen der Lösung mit den neu gebildeten Doppelsträngen auf 95 °C beginnt der Zyklus von vorne. Der Vorgang wird etwa 30 Mal wiederholt, die DNA-Abschnitte dabei jedesmal verdoppelt. 5 Die Lösung wird nun auf etwa 55 °C abgekühlt. Bei dieser Temperatur lagern sich die Primer an. 5 Die DNA-Probe der zu untersuchenden Person/des zu untersuchenden Lebe- wesens, DNA-Nukleotide, DNA-Poly­ merase und Primer werden in eine PCR-Tube gegeben. 5 Anschließend wird die Lösung auf zir- ka 72 °C erhitzt, die optimale Tempera- tur für die DNA-Polymerase, die nun die freigewordenen Basen mit den komplementären Nukleotiden auffüllt. 5 Das Gemisch wird in einem Thermo­ cycler erhitzt. Bei zirka 95 °C lösen sich die Wasserstoffbrückenbindun- gen zwischen den Basen bis letztend- lich zwei einzelne DNA-Polynukleotid- stränge vorliegen. 5 5 1 4 2 3 Primer-Extension T = 72 ºC Primer-Extension T = 72 ºC Primer Annealing T = ~50 ºC Denaturierung T = 95 ºC Wiederholung ca. 30 Zyklen Nur zu Prüfzwecken – Eigentum des Verlags öbv